10.3321/j.issn:1007-8738.2009.11.002
Sirt2基因的克隆及其在HEK293中的表达
目的:克隆大鼠Sirt2 基因, 构建其真核表达载体并在HEK293细胞中表达.方法:利用RT-PCR从大鼠脑组织总RNA中扩增出包含Sirt2编码区的cDNA片段, 产物纯化后T-A克隆连接至pMD20-T载体.以此为模板, 将该基因编码区克隆入真核表达载体pcDNA3.1myc-his(-)中, 转染HEK293细胞检测其表达.结果:测序证实所克隆的Sirt2编码区cDNA正确地插入pcDNA3.1myc-his(-)中, 经免疫荧光检测证实其在HEK293细胞中得到表达.结论:成功克隆了大鼠Sirt2 cDNA, 构建了其真核表达载体, 并在HEK293细胞中得到有效表达, 为进一步研究大鼠Sirt2的功能奠定了基础.
Sirt2、真核表达、克隆、cDNA
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Q786(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金资助项目30770420,30871239
2010-01-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
970-972