CCR5Delta32基因在人PBMC的表达及其对CCR5/CXCR4分子的影响

摘要：

目的:在人外周血单个核细胞(PBMC)内表达CCR5Delta32蛋白, 研究该蛋白与CCR5和CXCR4分子间是否存在相互作用.方法:构建pLenti-CCR5Delta32慢病毒载体, 包装后产生重组慢病毒.将其转染PBMC, 荧光显微镜观察转染情况, Western blot鉴定目的蛋白表达, 免疫共沉淀检测目的蛋白与CCR5和CXCR4分子间的相互作用.结果:成功构建了pLenti-CCR5Delta32慢病毒载体, 经包装后产生重组慢病毒, 滴度约为5×108 TU/L.将其转染PBMC, 观察到约半数PBMC胞质内有绿色荧光蛋白表达, 经Western blot鉴定有目的蛋白表达.免疫共沉淀结果显示, CCR5Delta32与CCR5、 CCR5Delta32与CXCR4以异源二聚体形式结合, 之间确实存在着相互作用.结论:成功地构建重组慢病毒载体并将其转染PBMC靶细胞, 观察到目的蛋白与HIV-1两类辅受体(CCR5和CXCR4)间确实存在相互作用.这些工作为后续的AIDS基因治疗研究奠定了基础.

关键词：CCR5Delta32基因、外周血单个核细胞、人类免疫缺陷病毒、辅受体

所属期刊栏目：25

分类号：R392.12

资助基金：国家自然科学基金资助项目30571675

在线出版日期：2009-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：849-850,852