重症肌无力单链抗体融合蛋白的酵母菌表达及特异性鉴定

摘要：

目的: 真核表达抗人乙酰胆碱受体单链抗体637(scFv637)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,以提高融合蛋白的产量和增强其生物学活性.方法: 将携带有重组质粒的毕赤酵母菌GS115用G-418筛选高拷贝重组转化子克隆,诱导表达目的蛋白,表达产物用斑点杂交试验检测,并以SDS-PAGE鉴定融合蛋白的相对分子质量(Mr),应用间接免疫荧光技术确定融合蛋白与人肋间肌乙酰胆碱受体(AChR)的亲和性.结果: 斑点杂交试验显示成功表达出目的蛋白,其Mr约为97 400,在人肋间肌细胞膜之间有荧光出现.结论: 在毕赤酵母菌GS115中成功表达出scFv637-HSA融合蛋白,并且融合蛋白可以与人肋间肌AChR结合,这为进一步研究融合蛋白的功能和应用奠定了基础.

关键词：重症肌无力、乙酰胆碱受体、单链抗体、融合蛋白、真核表达

所属期刊栏目：25

分类号：R392.1

资助基金：国家自然科学基金资助项目30360100,30760234,30860260

在线出版日期：2009-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：735-737