10.3321/j.issn:1007-8738.2009.06.026
小鼠IL-33的原核表达、纯化及鉴定
目的: 在大肠杆菌中表达具有生物学活性的白细胞介素-33(mIL-33).方法: 用PCR技术扩增小鼠IL-33成熟蛋白的编码区, 与原核表达载体pET-44连接, 构建pET-44-mIL-33表达载体, 转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达, 镍柱亲和层析法纯化目的蛋白, SDS-PAGE分析表达产物, MTT法测定纯化IL-33的生物学活性.结果: 成功构建了pET-44-mIL-33原核表达载体, 并在大肠杆菌中表达出可溶性mIL-33, SDS-PAGE分析纯化产物纯度为95%, 表达产量为95 mg/L.细胞增殖实验表明IL-33有抑制P815细胞增殖的活性.结论: 获得了有活性的重组IL-33蛋白纯品, 为后续功能研究奠定了基础.
白细胞介素-33、镍柱亲和层析、原核表达、重组
25
R-331;Q786(医学研究方法)
国家自然科学基金资助项目30671932,30770840
2009-06-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
553-555