10.3321/j.issn:1007-8738.2009.06.011
大鼠透明质酸合成酶-2抗血清的制备及鉴定
目的: 制备大鼠透明质酸合成酶-2(HAS-2)抗血清并鉴定抗血清灵敏度及其特异性.方法: 通过生物信息学分析选取HAS-2非保守的亲水区域作为抗原, 通过原核表达纯化后免疫家兔, 制备出抗血清.Western blot检测所制备抗血清的灵敏度.真核瞬时表达大鼠HAS-2和HAS-3, 分别用抗His抗体和抗血清检测, 鉴定制备抗血清的特异性.结果: 通过原核表达并纯化得到抗原多肽, 免疫家兔后获得ELISA效价大于1∶ 10 000的抗血清.所制备的抗血清至少可以检测出10 ng以上的抗原多肽, 并且能够特异地检测HAS-2而与HAS-3无反应.结论: 成功通过大鼠HAS-2非保守区域多肽的原核表达产物制备出高灵敏度和特异性的大鼠HAS-2抗血清, 为研究透明质酸(HA)的病理生理意义提供了有利支持.
透明质酸、透明质酸合成酶-2、重组表达、抗血清
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R392.11
国家自然科学基金资助项目30270515
2009-06-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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