纳米磁流体介导的重组pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性肝癌细胞HepG2的杀伤作用的体外实验

摘要：

目的: 探讨纳米磁流体介导的重组质粒pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2的杀伤作用.方法:通过纳米磁流体将构建好的重组质粒pEGFP-AFP-TK 并分别转染AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2 及AFP表达阴性肝癌细胞SMMC-7721,于荧光显微镜下动态观察;使用RT-PCR和Western blot分析HepG2 细胞中TK 基因的表达情况,MTT法检测转染重组TK表达质粒后的细胞在更昔洛韦(GCV)作用下的存活率并观察旁观者效应,用流式细胞术分析HepG2细胞的凋亡.结果:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-TK转入AFP阳性的HepG2 细胞,其转染效率高于脂质体;RT-PCR 及Western blot证明转染的AFP阳性的HepG2 细胞有TK基因的表达;MTT 及流式细胞术分析说明TK基因发挥杀伤细胞作用.结论:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-TK转染HepG2细胞并获得表达,可作为肝癌基因治疗的基因载体,采用AFP增强子可使目的基因在HepG2 细胞中特异性表达,并且在前药GCV的作用下,能使AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2发生凋亡及旁观者效应.

关键词：纳米磁流体、AFP、TK基因、GCV

所属期刊栏目：25

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金资助项目 30672047

在线出版日期：2009-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：437-439,442