Autotaxin多克隆抗体的制备

摘要：

目的:表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的Autotaxin(58-157位氨基酸)融合蛋白,制备抗Autotaxin的多克隆抗体.方法:构建pET-21c-Autotaxin(58-157)重组表达质粒,转入BL21大肠杆菌,IPTG诱导蛋白表达,经镍离子金属螯合树脂纯化后,用纯化的蛋白免疫家兔,制备抗Autotaxin的多克隆抗体.ELISA检测抗体效价,Western blot检测抗体特异性,并用于免疫组化实验.结果:在大肠杆菌中高表达Autotaxin(58-157)-His6融合蛋白,经亲和纯化后免疫家兔,获得了特异性的抗Autotaxin抗血清.结论:成功构建pET-21c-Autotaxin(58-157)表达质粒,原核表达获得高纯度的目的蛋白,制备出高效价的特异性抗Autotaxin多克隆抗体.

关键词：Autotaxin、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：24

分类号：Q7(分子生物学)

资助基金：北京市科技计划项目Z0006329000191;教育部新世纪优秀人才支持计划项目NECT-05-0145;北京师范大学本科生科研基金2007年度

在线出版日期：2009-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1194-1196