重组人Jo-1自身抗原的克隆、原核表达及抗原特异性鉴定

摘要：

目的:旨在获得高纯人Jo-1抗原(即组氨酰-tRNA合成酶).方法:利用RT-PCR从人胎盘总RNA中获得Jo-1的编码基因,并分别用IMPACT-CN和pMAL系统的pTYB11、 pMAL-c质粒,构建了表达载体,转化至大肠杆菌ER2566、 BL21.结果:经筛选与鉴定,得到阳性重组子诱导表达后均获得Jo-1融合蛋白.Western blot显示,这两种融合蛋白都具有Jo-1抗原特异性,即仅与含Jo-1抗体的多肌炎和皮肌炎自身免疫病患者血清反应,而与正常人以及188例含有其他自身抗体(分别为RNP阳性、 Sm阳性、 Ro/La阳性和RNP/Ro阳性)的患者血清均为阴性反应.结论:在两种表达载体中,pMAL-c-Jo-1的表达量超过菌体蛋白的50%,而且以可溶性形式存在,有利于分离纯化,为临床检测创造了条件.

关键词：Jo-1、基因、表达、抗原特异性

所属期刊栏目：24

分类号：Q7;R392.11

资助基金：河北省自然科学基金资助396062;河北省生物工程重点学科资助2008年

在线出版日期：2009-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1170-1173