DC-SIGN特异性适配子的筛选及鉴定

摘要：

目的:筛选高特异性、高亲合力结合DC-SIGN的单链DNA适配子,为开发抗HIV、 HCV和结核杆菌感染的新型预防和治疗试剂奠定基础. 方法:采用基于细胞表面展示的SELEX技术(TECS-SELEX),筛选出具有高亲合力结合DC-SIGN的单链DNA(ssDNA)适配子;运用流式细胞术(FCM)检测该适配子的亲合力;对最高亲合力适配子库进行克隆和测序;ELISA和FCM方法检测单适配子ZD8与DC-SIGN蛋白结合的剂量相关性;MTT法测定IC50观察适配子对细胞的毒性. 结果:第14轮筛选的适配子库亲和力最高;DC-SIGN抗体能抑制适配子结合表达DC-SIGN蛋白的细胞;第14轮库中筛选的单适配子ZD8 与DC-SIGN蛋白的结合率呈剂量依赖性;所筛选的单适配子对肝细胞几乎无毒性.结论:成功筛选出DC-SIGN蛋白的ssDNA适配子,为防治HIV、 HCV和结核杆菌感染等DC-SIGN相关性疾病,提供新型预防和治疗的候选试剂和小分子药物.

关键词：DC-SIGN、适配子、TECS-SELEX

所属期刊栏目：24

分类号：R392-33

资助基金：国家自然科学基金资助项目30670098;湖北省自然科学基金2006ABD007

在线出版日期：2009-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1133-1136