聚乙二醇修饰鼠抗人CD3单克隆抗体

摘要：

目的:确定一条聚乙二醇化鼠抗人CD3单克隆抗体(mAb)和抗体片段的制备工艺路线.方法:以胃蛋白酶酶解并通过凝胶柱分离和纯化得到抗体Fab′, 利用PEG-SPA修饰抗体和抗体片段Fab′上的氨基, 通过体内和体外T细胞增殖实验, 考查修饰后的抗体和抗体片段的免疫活性.结果:较佳的修饰工艺条件为:在pH9.0硼酸缓冲液, 反应温度25℃, 抗体浓度0.2 g/L, 抗体和聚乙二醇摩尔比为1∶ 20, 反应3 h.修饰后抗CD3 mAb全抗, 对T淋巴细胞增殖抑制活性下降了32.3%, 抗体Fab′下降了8.0%, PEG化Fab′下降了19.9%.利用ELISA检测血液中修饰后的抗体和抗体片段的半衰期.结果显示mPEG修饰后抗体和抗体片段血药浓度降低明显减缓, 修饰后抗CD3抗体半衰期从2.66 h延长到8.72 h, 延长了3.28倍.而修饰后抗体Fab′片段半衰期从2.21 h延长到4.17 h, 延长了1.90倍.结论:利用聚乙二醇修饰抗体和抗体片段, 提高了抗体半衰期, 且无细胞毒性, 活性损失较小, 该技术具有较高的可行性, 可极大地提高mAb尤其是非人源性抗体在临床上的应用.

关键词：单克隆抗体、CD3、聚乙二醇、化学修饰、免疫活性

所属期刊栏目：24

分类号：R392.11

资助基金：浙江省重大科技攻关资助项目2005C13025

在线出版日期：2009-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1096-1098,1101