重组人白介素18在毕赤酵母中的高效分泌表达

摘要：

目的:构建人白介素18(hIL-18)真核表达载体, 在毕赤酵母中高效分泌表达hIL-18.方法:通过PCR法扩增得到hIL-18基因, 构建其真核表达载体pPICZaC/hIL-18, 电转化毕氏酵母X-33, PCR、 SDS-PAGE、 Western blot等方法筛选获得高效表达rhIL-18的工程菌株, 疏水层析和阴离子交换层析纯化表达产物, 并初步测定其生物学活性.结果:rhIL-18经甲醇诱导后其表达产量约为202 mg/L.Western blot检测了rhIL-18的特异性结合活性; rhIl-18纯化后纯度达95%左右, 并证明rhIL-18能够协同IL-2诱导PBMC分泌IFN-γ.结论:构建了重组hIL-18的基因工程菌, 并在毕赤酵母中实现了高效分泌表达, 为进一步研究其活性和功能奠定了基础.

关键词：人白细胞介素18、毕赤酵母、表达、纯化

所属期刊栏目：24

分类号：R392.11

资助基金：天津市科技创新专项资金项目06FZZDSF1500

在线出版日期：2009-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1040-1043