10.3321/j.issn:1007-8738.2008.06.001
人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白的构建和表达
目的:构建和表达人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并测定该融合蛋白的生物学活性.方法:采用PCR和ovelap PCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用150 g/L SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化产物;采用FACS法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性.结果:DNA序列测定结果表明:人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白已构建成功,表达可溶性产物的产量达4 mg/L以上,具有与Raji细胞(CD20+)和A549(4-1BB+)细胞结合的活性.结论:利用融合蛋白形式,首次成功地构建了人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白,并获得较高表达.表达产物具有与相应2个靶抗原结合的活性.
4-1BBL、CD20、融合蛋白、免疫治疗
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R392
国家自然科学基金资助项目30572203,30570772;山东省自然科学基金资助项目Q2006C02
2008-07-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
543-545,549