马γ-干扰素双抗体夹心ELISA检测方法的建立

摘要：

目的:建立检测马γ-干扰素的双抗体夹心 ELISA,为马传染病的免疫学研究提供新方法.方法:将识别不同表位的抗马γ-干扰素的2株单克隆抗体(mAb,A5和SB10)纯化后,利用生物素标记试剂盒对其中1株纯化的mAb(SB10)进行标记,通过对重组马IFN-γ进行ELISA检测来建立马γ-干扰素双抗体夹心ELISA.结果:经过方阵滴定实验确定捕获抗体的最佳浓度为1 mg/L,检测抗体的工作效价为1∶1 000.利用建立的方法对不同稀释度的重组马γ-干扰素和丝裂原刺激的马外周血单核细胞培养上清进行检测.结论:此方法检测敏感度达到1μg/L,特异性良好,为马的细胞免疫学研究提供了方法,并为建立马γ-干扰素ELISPOT检测方法奠定了基础.

关键词：马γ-干扰素、夹心ELISA

所属期刊栏目：24

分类号：R392.33

资助基金：国家高技术研究发展计划863资助项目2006AA10A203;黑龙江省自然科学基金重点资助项目ZJN-0602-01

在线出版日期：2008-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：464-466