人工分子伴侣辅助鸡白细胞介素18重组蛋白的复性

摘要：

目的:研究表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)组成的人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性,以提高鸡IL-18重组蛋白复性率,获得更多具有良好活性的蛋白.方法:将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达.表达产物主要以包涵体的形式存在.包涵体经超声波破碎、洗涤后以6 mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性,然后利用人工分子伴侣系统辅助蛋白复性.复性产物经透析纯化后,利用淋巴细胞增殖试验来检测其活性.结果:经SDS-PAGE分析表明,表达产物是与ChIL-18重组蛋白相符的Mr约44000的蛋白条带.利用人工分子伴侣系统辅助复性,鸡IL-18重组蛋白获得了42.54%复性率.鸡淋巴细胞增殖试验表明,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导增殖作用.结论:人工分子伴侣系统能够较好地辅助鸡IL-18重组蛋白复性,获得较高的复性率.其产物具有良好的生物学活性,为下一步鸡IL-18重组蛋白的应用研究奠定了试验基础.

关键词：人工分子伴侣系统、鸡白细胞介素18重组蛋白、β-环糊精、复性、表面活性剂

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分类号：R392.11

资助基金：国家科技支撑计划重大项目2006BAK02A21;山东省科技攻关项目SDSP2005041005;山东省优秀中青年科学家科研奖励基金2006BS06015

在线出版日期：2008-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：344-347