小鼠Foxp3抗血清的制备及应用

摘要：

目的:制备高效价的特异性小鼠Foxp3抗血清,并初步应用于正常小鼠组织的Foxp3表达的鉴定.方法:构建重组质粒pGEX-6p-2/Foxp3,并转化至E.coli BL21(DE3)中进行大量诱导表达,用纯化的重组融合蛋白免疫新西兰兔,制备抗血清.以制备的抗血清为一抗,Western blot检测小鼠组织的Foxp3蛋白的表达.结果:SDS-PAGE及Western blot鉴定,诱导表达及纯化的重组融合蛋白能被抗GST单克隆抗体(mAb)识别,在Mr 45 000附近有特异条带,与预期融合蛋白大小一致,获得的抗血清效价在1:12 800以上,该抗血清能特异性识别NIH3T3细胞中表达的Foxp3蛋白.Western blot鉴定结果显示在脾脏、胸腺、淋巴结中Foxp3蛋白有较高表达,胃也有少量的表达,而骨骼肌、脂肪组织未见表达.结论:制备了高效价的特异性小鼠Foxp3抗血清,并可用于正常小鼠组织的Foxp3蛋白的表达鉴定,为进一步研究Foxp3奠定了实验基础.

关键词：Foxp3、CD4+CD25+Treg细胞、抗血清制备

所属期刊栏目：24

分类号：R392.11

资助基金：湖南省自然科学基金05JJ30043

在线出版日期：2008-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：153-155,158