大鼠肝硬化模型中小肝细胞分离培养方法的建立及其表型分析

摘要：

目的:探讨体外分离培养大鼠小肝细胞(SHC)的方法,并对其进行表型鉴定.方法:利用二乙基亚硝胺饲喂法,建立SD大鼠肝硬化模型.采用改进后两步胶原酶灌注消化法分离细胞.光镜下观察细胞形态.电镜下观察细胞形态及超微结构.采用计数法测定细胞生长曲线,流式细胞术(FCM)测定细胞周期.通过免疫细胞化学染色法进行表型鉴定.结果:原代培养的大鼠SHC,24h内即可见贴壁伸展,48h左右克隆形成.光镜下可观察SHC核仁小而清晰,胞质少,细胞体积较小;电镜下可见SHC表面少量短而小的微绒毛突起,细胞体积小,核浆比例高,呈现未分化细胞的形态.免疫细胞化学染色显示SHC胞质AFP、CK-7、CK-8及CK-19呈棕黄色阳性信号.结论:改进后的两步胶原酶灌注消化方法能较容易地获得大量纯度较高的SHC.

关键词：大鼠小肝细胞、分离、培养、免疫细胞化学

所属期刊栏目：23

分类号：R392.11

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：1203-1204