10.3321/j.issn:1007-8738.2007.12.012
乙肝表面抗原突变体的表达及其初步应用
目的:构建和表达乙肝表面抗原(HBsAg)突变体用于HBsAg抗原性的深入研究.方法:利用定点突变技术构建HBsAg突变体,然后转化毕赤酵母GS115,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot分析,利用AxSYM HBsAg V2(Abbott)酶免试剂盒检测重组表面抗原的活性.结果:通过序列分析确定突变体构建成功,SDS-PAGE显示突变体能在毕赤酵母中有效表达,在Western blot试验中HBsAg突变体被特异性多克隆抗体识别,相对分子质量(Mr)约为38 000,AxSYM试剂盒检测结果表明HBsAg突变体具有一定生物活性.结论:利用毕赤酵母表达系统高效表达出具有一定免疫反应性的HBsAg突变体,对于目前市售试剂盒的质量控制和临床应用有较高的实档用价值.
乙肝表面抗原突变体、毕赤酵母、免疫反应性
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R392.12
上海市科委资助项目07DZ19502
2008-03-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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