10.3321/j.issn:1007-8738.2007.12.008
IDO修饰的成纤维细胞培养上清对小鼠T淋巴细胞增殖的影响
目的:检测吲哚胺2-3双加氧酶(IDO)基因修饰的细胞对T淋巴细胞的免疫抑制作用.方法:将pEGFP-N1-mIDO真核表达载体转染至小鼠NIH 3T3成纤维细胞系.体外检测mIDO修饰的成纤维细胞培养液中色氨酸水平的变化;使用CFSE标记技术,检测mIDO修饰的成纤维细胞培养液对ConA刺激的小鼠T淋巴细胞增殖的影响.结果:将pEGFP-NI-mIDO转入NIH 3T3成纤维细胞,流式细胞术(FCM)检测到EGFP的表达;体外实验表明,成纤维细胞培养上清和转染pEGFP-N1的成纤维细胞培养上清可检测到一定量的色氨酸水平,而转染pEGFP-N1-mIDO的成纤维细胞培养上清未检测到色氨酸,提示pEGFP-N I-mIDO转染的成纤维细胞表达了具有活性的mIDO;使用CFSE标记技术,检测mIDO修饰的成纤维细胞培养上清对小鼠T淋巴细胞增殖的影响,发现ConA刺激的IDO组,72 h后亲代细胞占各代细胞的百分率明显高于对照组.结论:IDO基因修饰的成纤维细胞可抑制T淋巴细胞的增殖.
IDO基因、T细胞增殖、免疫抑制、CFSE
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R392.12
高等学校博士学科点专项科研项目20050558093;中国博士后科学基金20060390755;卫生部部属管医疗机构临床学科重点项目2004-468
2008-03-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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