树突状细胞胞外体(Exosome)的超滤离心法提取及形态观察

摘要：

目的:利用树突状细胞(DC)胞外体(Ex)的物理特性,探讨基于DC-Ex的大小和密度,用超滤离心法制备DC-Ex的实验方法,以改进传统方法、提高收获效率.方法:选用小鼠树突状细胞株DC2.4为研究对象,收集细胞培养上清,中空纤维器去除细胞及细胞碎片,Amicon Ultra超滤离心管压缩体积,密度梯度超离心纯化获得DC-Ex提取物.对照组则采用传统的分级分离方法.应用透射电镜进行形态学鉴定,并采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行检测.结果:DC-Ex提取物超微结构形态及SDS-PAGE带型和文献报道类似,包含有主要的特征性标志物分子MHC-Ⅰ,MHC-Ⅱ,CD80和CD86;与分级分离法相比,超滤离心法耗时少,产量和纯度较高.结论:超滤离心法是一种简便高效的提取Ex的方法.

关键词：胞外体、树突状细胞、超滤、离心、提取

所属期刊栏目：23

分类号：R392.12

资助基金：国家自然科学基金30571659;30570086

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1119-1121