脂质体介导pIDO-EGFP转染原代培养软骨细胞的初步研究

摘要：

目的:检测脂质体介导pIDO-EGFP转染原代培养的C57小鼠关节软骨细胞的瞬时表达及转染效率,建立原代培养的小鼠关节软骨细胞转染方法.方法:大肠杆菌中扩增pIDO-EGFP质粒,在最优化条件下通过lipofectamine2000TM转染试剂将pIDO-EGFP质粒转入原代培养的小鼠关节软骨细胞,应用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察其转染过程及瞬时表达情况,流式细胞术检测其转染效率.结果:质粒携带的增强型绿色荧光蛋白在转染后24h得到了明显表达,48 h后流式细胞术检测其转染效率为36.43%,未影响软骨细胞贴壁过程.结论:经绿色荧光蛋白检测表明,脂质体成功地将IDO基因转染进入原代培养的软骨细胞.转染后的软骨细胞在体外仍能存活,在最优化的条件下能达到良好的瞬时转染效率,为组织工程化软骨细胞基因导入和基因修饰提供了思路.

关键词：基因转染、软骨细胞、基因表达、吲哚胺2、3-双加氧酶、绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：23

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金30472007;广东省自然科学基金04009337;广东省科技计划社会发展计划2004B34001002;陕西省西安市科技计划2006

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1110-1112,1116