抗禽流感病毒H7亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制

摘要：

目的:研制禽流感病毒H7亚型血凝素特异性单克隆抗体(mAb).方法:以H7亚型禽流感诊断抗原为免疫原免疫6～8周雌性BALB/c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14进行融合.通过HA和HI试验筛选阳性克隆.应用HI试验和Western blot试验测定mAb的反应性和特异性.结果:共获得4株分泌抗AIV H7亚型HAmAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为2E2、2A4、5F5、7G5.这些mAb的腹水HI效价在5×27～5×211之间,其中2E2属于IgM亚类,2A4属于IgG1亚类,5F5、7G5属于IgG2a亚类.Western blot分析结果显示,4株AIV H7亚型HA mAb能与AIV H7蛋白在Mr 75 000处反应,但不与新城疫病毒(NDV)蛋白发生反应,表明这些mAb能特异性识别AIV H7亚型HA.mAb HI反应性测定结果表明:4株mAb中,2E2、5F5、7G5只与H7亚型AIV发生特异性HI反应,而不与其他亚型AIV以及NDV、传染性支气管炎病毒(IBV)反应,显示出良好的特异性;而2A4除了与H7亚型AIV反应外,还与H15N8标准株发生低水平交叉反应.结论:这些mAb不仅为H7亚型AIV的HA结构分析提供了工具,而且为建立快速廉价的H7亚型禽流感诊断方法提供了核心试剂.

关键词：禽流感病毒、H7亚型、血凝素、单克隆抗体

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分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金30425031;国家科技攻关计划2004BA519A24;教育部全国优秀博士学位论文作者专项基金200358

在线出版日期：2007-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：953-955