中性粒细胞增强类风湿关节炎滑膜细胞产生基质金属蛋白酶及其细胞侵袭力

摘要：

目的:研究中性粒细胞表面CD147分子对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)产生基质金属蛋白酶(MMP)及细胞侵袭力的作用.方法:取自关节镜或骨科手术治疗的RA、骨关节炎(OA)患者的滑膜组织,体外分离培养FLS,通过流式细胞术(FCM)检测细胞表面分子及形态学方法鉴定.采用全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞(人早幼粒白血病细胞株)诱导中性粒细胞分化,并用硝基蓝四氮唑(NBT)还原反应测定其分化程度.进而以FCM测定分化前后的HL-60细胞及FLS表面CD147的表达,并通过明胶酶谱和重组基质侵袭实验检测分化前后HL-60细胞对FLS MMP表达和细胞侵袭能力的作用以及CD147拮抗肽(AP-9)对这种MMP表达和细胞侵袭能力的抑制作用.结果:成功建立了FLS分离培养和HL-60细胞分化的实验体系.培养的FLS具有典型成纤维细胞的形态,均一的高度表达CD90(＞98%)而不表达CD14.分化后的HL-60细胞CD147表达上调,RA FLS细胞CD147表达水平低于分化前及分化后HL-60细胞(P＜0.05).明胶酶谱试验显示:①与OA FLS相比,单培养的RA FLS表达较高水平的酶原及活化形式的MMP-2(P＜0.05);②分化前/后的HL-60细胞分别与FLS共培养,酶原及活化形式的MMP-2和MMP-9的表达水平较这些细胞单独培养均显著升高(P＜0.05),且分化后的HL-60细胞与FLS共培养酶原及活化形式MMP-2表达水平较分化前HL-60细胞与FLS共培养明显升高(P＜0.05);③AP-9显著抑制两共培养组中MMP-2和MMP-9的上调作用(P＜0.05).侵袭实验显示:RA FLS侵袭能力高于OA FLS(P＜0.05);分化前后的HL-60均可增加RA FLS的侵袭能力(P＜0.05),且分化后强于分化前(P＜0.05);AP-9可抑制这一促进作用,降低FLS的侵袭能力(P＜0.05).结论:中性粒细胞可能通过CD147促进RA患者滑膜FLS MMP-2、MMP-9的表达和活化,增强FLS的侵袭能力,这种促进作用可被CD147拮抗肽所抑制,将为RA关节软骨和骨损伤机制和治疗的进一步研究提供了重要的线索.

关键词：类风湿关节炎、成纤维样滑膜细胞、基质金属蛋白酶、EMMPRIN/CD147、中性粒细胞、HL-60细胞

所属期刊栏目：23

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金30530720

在线出版日期：2007-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：827-830