以DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体及特性分析

摘要：

目的:联合应用DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性.方法:利用分子克隆的方法构建重组质粒pcDNA3.1/DAF.以其免疫BALB/c小鼠股四头肌3次, 并在融合前用表达DAF分子的HPB-ALL细胞为抗原加强免疫1次, 制备抗DAF mAb.以ELISA法测定mAb的Ig亚类.采用流式细胞术和Western blot鉴定mAb的特异性和结合活性.以非免疫竞争法测定mAb的亲和常数.结果:成功地获得2株可识别DAF分子不同抗原表位的mAb B6E和2B6B, 其Ig亚类均为IgG2a.mAb 2B6E的亲和常数为1.81×10 -7mol/L, 与天然的细胞膜蛋白、变性的膜蛋白以及重组DAF蛋白都有良好的结合活性和特异性.结论:先以pcDNA3.1/DAF肌肉内免疫, 再应用细胞抗原加强免疫的方法制备特异性的mAb, 为在无法获得纯化蛋白质的情况下开拓了研制特异性抗体的新途径, 也为日后改造抗DAF mAb进行靶向治疗研究打下了基础.

关键词：DAF、DNA免疫、细胞抗原加强免疫、单克隆抗体

所属期刊栏目：23

分类号：R392.11

在线出版日期：2007-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：652-656