幽门螺杆菌cagA蛋白的制备级复性和纯化

摘要：

目的:通过优化复性液的组成、 pH值、稀释度等, 建立幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A(cytotoxin associated gene A, cagA)表达产物的制备级复性及纯化方法.方法:以包涵体形式存在的cagA表达产物先用5 mL/L Triton X-100进行初步纯化, 使其纯度达到约90%;再用含8 mol/L脲的变性剂溶解包涵体, 用复性液[0.1 mol/L Tris-HCl、 2 mmol/L 乙二胺四乙酸(EDTA)、 0.1 mmol/L 氧化型谷胱甘肽(GSSG)、 8 mmol/L还原型谷胱甘肽(GSH)及 50 mmol/L 精氨酸(Arg), pH8.0]稀释复性后, 用DEAE-HP阴离子交换色谱进行纯化.结果:用稀释法复性及液相色谱法纯化, 一次可得到100～140 mg的cagA.ELISA检测其抗原活性为1∶ 16　000;SDS-PAGE检测纯度为98%.结论:用制备级复性、纯化制备的cagA, 可作为抗原用于制备检测抗幽门螺杆菌抗体的检测芯片, 效果良好, 并已获得国家新药批文.

关键词：幽门螺杆菌、细胞毒素相关基因蛋白A、复性、纯化

所属期刊栏目：23

分类号：R372(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2007-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：381-382