新型重组α型干扰素原核表达载体的构建、表达及活性检测

摘要：

目的:合成一种新型重组α型干扰素(IFN-α)基因序列, 使其在大肠杆菌中表达, 并检测其生物活性.方法:人工合成新型重组IFN-α基因全长, 将PCR扩增产物与pUC18进行双酶切后构建克隆载体, 并转化至大肠杆菌, 经蓝白斑筛选, 提取质粒, 以EcoR I和BamH I双酶切, 插入表达载体pBV220, 转化至大肠杆菌, 42℃热诱导表达目的蛋白.超声破菌, 抽提复性后以Sephacryl S-200HR分离获得目标蛋白.在转染有乙型肝炎病毒基因的人肝癌细胞系2.2.15细胞中, 研究其对HBsAg和HBeAg的分泌的影响.结果:重组质粒读码框经测序与预期一致, 表达产物经SDS-PAGE分析获得证实, 与2.2.15细胞培养8 d, 对HBeAg和HBsAg的分泌具有一定的抑制作用.结论:成功地构建原核表达载体pBV220-IFN-α, 并使其在大肠杆菌中获得融合表达, 重组表达的新型重组IFN-α具有抗病毒作用.

关键词：重组α干扰素、原核表达、抗病毒效应

所属期刊栏目：23

分类号：Q786;R978.7(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2007-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：374-376