杜氏利什曼原虫amastin基因重组真核表达质粒的构建与表达

摘要：

目的:构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白(amastin)编码基因的真核表达重组质粒pcDNA3.1-amastin, 并研究其在NIH3T3细胞中的表达.方法:提取杜氏利什曼原虫基因组DNA进行PCR扩增.将扩增的无鞭毛体蛋白基因片段导入质粒pcDNA3.1(+)中, 构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-amastin.以pcDNA3.1-amastin转染NIH3T3细胞, 采用免疫荧光染色法和RT-PCR分别鉴定pcDNA3.1-amastin的瞬时表达和稳定表达.结果:在细胞膜和细胞内均观察到较强的绿色荧光, 表明pcDNA3.1-amastin成功地转入NIH3T3细胞, 并在细胞膜和细胞内获得短暂表达.稳定转染的NIH3T3细胞的总RNA经反转录后, 用PCR扩增出无鞭毛体蛋白基因, 表明获得了稳定表达.结论:成功地构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因的真核表达重组质粒, 并且该基因在NIH3T3细胞中获得了稳定表达.

关键词：杜氏利什曼原虫、无鞭毛体蛋白基因、体外表达

所属期刊栏目：23

分类号：R382.2+2(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金39870656

在线出版日期：2007-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：217-219,222