不同刺激剂和培养环境对CD4+、CD8+T细胞内细胞因子表达的影响

摘要：

目的:探讨不同的刺激剂和不同的培养条件对CD4+和CD8+ T细胞内细胞因子表达的影响.方法:分离正常人的外周血单个核细胞(PBMC),分别加入3种不同的刺激剂(PHA,抗CD3和抗CD28 mAb,PMA和离子霉素),置于4种不同的培养环境下(室温,37℃水浴,37℃培养箱,37℃ 50 mL/L CO2培养箱)培养4.5 ～5 h.收集细胞,以荧光素-mAb标记后,用流式细胞术分析CD4+、CD8+ T细胞内IL-2、IFN-γ和TNF-α的表达.结果:CD4+和CD8+ T细胞内细胞因子的表达,随着刺激剂的不同而有所差别,且在上述4种培养环境中,PMA的刺激效果最强,抗CD3 mAb次之,PHA的刺激效应最弱.以上述3种刺激剂刺激后,不同培养条件对T细胞内细胞因子的表达有一定的影响.室温培养时几乎检测不到细胞因子的表达,而在37℃水浴、37℃培养箱和37℃ 50 mL/L CO2培养箱中培养时,表达细胞因子的CD4+和CD8+ T细胞的百分率差异无统计学意义(P＞0.05).结论:不同刺激剂体外刺激T细胞表达细胞因子的效应不同,依次为PMA和离子霉素＞抗CD3和抗CD28 mAb＞PHA.体外刺激培养的T细胞活化过程中,温度是重要的条件,CO2无明显影响.

关键词：流式细胞术、T细胞亚群、细胞因子、刺激剂、培养条件

所属期刊栏目：23

分类号：R392.12

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2001CB510007;广东省广州市科技局科技攻关项目2004Z32E4031;广东省自然科学基金04105349

在线出版日期：2007-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：168-171