两步串联层析法纯化鼠抗人CD28单克隆抗体2F5

摘要：

目的:建立从小鼠腹水中纯化鼠抗人CD28单克隆抗体(mAb)2F5的两步串联层析法.方法:将含mAb 2F5的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换预处理后,先经固相化金属螯合亲和层析法(immobilized metal affinity chromatography,IMAC)纯化,去除大部分杂蛋白,再经凝胶过滤层析法(gel filtration,GF)精细纯化,并探讨了上样的流速和洗脱液的种类对mAb 2F5纯度的影响.纯化的mAb 2F5的生物学活性用3H-TdR掺入法进行分析.结果:以两步串联层析法纯化的鼠抗人CD28 mAb 2F5的纯度大于90%,总回收率达70%.纯化的mAb 2F5在体外对PBTC具有明显的促增殖作用; 而且其促增殖作用的活性优于Protein G亲和层析法(affinity chromatography,AC)纯化所获得mAb.结论:建立的两步串联层析纯化方法操作简便,所得mAb的纯度高、生物学活性好.

关键词：固相化金属螯合层析法、凝胶过滤层析法、纯化、单克隆抗体

所属期刊栏目：23

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金30330540;江苏省重点实验室基金2003

在线出版日期：2007-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：152-154