10.3321/j.issn:1007-8738.2007.02.005
预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其抗原性的鉴定
目的:研究预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其模拟S2蛋白的抗原性.方法:用DNAStar软件对S2亚基序列进行分析,预测B细胞表位所在肽段.通过4轮PCR反应人工搭建预测表位cDNA序列并克隆到含有伴侣10基因的pET28a(+)载体中,构成重组载体pET28-chap10-S2epi.重组蛋白Chap10-S2epi在E.coli BL21(DE3)中表达并以SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.用纯化的chap10-S2epi免疫家兔制备抗血清,并通过ELISA判断Chap10-S2epi的抗原性.结果:成功构建并在大肠杆菌中表达了Chap10-S2pei融合蛋白.Chap10-S2epi免疫的抗血清能识别真核细胞表达的SARS冠状病毒全长S2刺突蛋白.结论:预测的SARS冠状病毒S2刺突蛋白B细胞表位肽能够诱导家兔产生针对S2蛋白的抗体,为研制抗SARS病毒基因工程疫苗奠定了基础.
SARS冠状病毒刺突蛋白、B细胞表位预测、伴侣10分子、S2亚基
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R373(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金30328010
2007-03-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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