单核细胞源性树突状细胞表达淋巴细胞趋化因子mRNA的初步研究
目的: 体外诱导、培养单核细胞源性树突状细胞(DC), 研究其淋巴细胞趋化因子(lymphotactin, Lptn)mRNA表达的动态变化.方法: 采用密度梯度离心的方法分离人外周血中的单个核细胞(PBMC), 用重组人粒细胞-巨噬细胞集落群体刺激因子(rhGM- CSF)、重组人白细胞介素- 4 (rhIL- 4)刺激贴壁的单核细胞, 诱导培养DC, 第6天用重组人肿瘤坏死因子- α(rhTNF- α)诱导DC成熟.用流式细胞术检测成熟和未成熟的DC表面分子CD1a和CD83; 在电镜下观察成熟DC的形态; 以RT-PCR法扩增其Lptn cDNA并克隆至pGM-T Easy T载体中, 测序; 以RT-PCR结合凝胶成像分析系统, 半定量分析培养3、 5及7 d DC的Lptn mRNA表达的强度.结果: 电镜观察培养7 d的细胞具有典型的DC形态, 流式细胞术检测DC表面分子CD83呈高水平表达.用RT-PCR法克隆的cDNA序列与GenBank中U23772(登陆号)提供的序列一致.培养3 d的DC不表达Lptn mRNA, 培养7 d的DC较培养5 d的DC Lptn mRNA表达增强.结论: 单核细胞源性DC能表达Lptn mRNA, 随着DC的成熟, Lptn mRNA的表达增强.
树突状细胞、淋巴细胞趋化因子、单核细胞
22
R392.12
国家自然科学基金30271300
2006-12-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
723-725