Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗免疫原性

摘要：

目的:构建克隆结核分枝杆菌Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗,并在COS-7细胞中表达,研究该疫苗的免疫原性.方法:克隆Mtb8.4/hIL12嵌合基因,并导入真核表达载体pCI-neo中,构建pCI-neo-Mtb8.4/hIL12重组真核质粒.用限制性内切酶消化、 PCR及DNA序列测定等鉴定后,转染COS-7细胞,用RT-PCR和Western blot鉴定Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平的表达.用Mtb8.4/hIL-12嵌合基因疫苗免疫C57BL/6N小鼠,收集脾细胞培养上清检测细胞因子的水平,并用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定细胞毒性T细胞(CTL)的杀伤作用.结果:pCI-neo-Mtb8.4/hIL12重组质粒构建成功.以其转染COS-7细胞后,Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平获得表达.Mtb8.4/hIL-12嵌合基因疫苗能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,IFN-γ和IL-2的分泌增加,IL- 4的分泌减少,特异性CTL的杀伤活性增强.结论:成功地构建pCI-neo-Mtb8.4/hIL12重组质粒,并在COS-7细胞中表达.构建的Mtb8.4/hIL12基因疫苗具有较强的免疫原性,可明显诱导CTL的杀伤活性.

关键词：结核病、Mtb8.4、hIL-12、嵌合基因、免疫原性

所属期刊栏目：22

分类号：R378.91+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：四川省青年科技基金川青科基2002-1;四川省重点学科建设项目SZD0241

在线出版日期：2006-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：597-600