抗人乙酰胆碱受体scFv-人血清白蛋白融合蛋白的构建及在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的: 制备抗人乙酰胆碱受体单链抗体637(scFv637)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,提高scFv637的稳定性.方法: 用PCR扩增人HSA基因,并克隆到含有抗人乙酰胆碱受体scFv637基因的载体pHEN2中构建重组载体pHEN2-scFv637-HSA.以重组载体转化E.coli HB2151,表达产物用斑点杂交试验检测,并以SDS-PAGE和Western blot鉴定其融合蛋白的相对分子质量(Mr).结果: 琼脂糖凝胶电泳显示,扩增的人HSA基因和融合基因的大小分别为1 770 bp和7 054 bp.构建的scFv637-HSA经测序证实核苷酸序列正确,并且正确克隆至载体的开放读码框架内.表达产物仅存在于pHEN2-scFv637-HSA转化的E.coli HB2151外周质裂解液中.表达的融合蛋白的Mr约为95 900.结论: 在E.coli中成功地表达scFv637-HSA融合蛋白,为进一步对其进行功能研究和应用奠定了基础.

关键词：重症肌无力、乙酰胆碱受体、单链抗体、融合蛋白

所属期刊栏目：22

分类号：R392.1

资助基金：国家自然科学基金30360100

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：507-509