类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的表型及其侵蚀软骨的特性

摘要：

目的: 分离培养类风湿关节炎(RA)滑膜细胞、检测其表面标志及研究其对软骨的侵蚀特性.方法: 取6例RA患者滑膜,分别采用组织块、胰蛋白酶消化及胶原酶、胰蛋白酶先后消化培养后,用相差显微镜观察细胞的形态、用流式细胞术(FCM)检测培养细胞表面标记CD3、CD19、CD14、CD68、CD44、CD55、CD90及细胞内脯氨酰-4-羟基化酶(Prolyl-4-hydroxylase)的表达并与传统的免疫组化染色法检测波形蛋白的表达相比较.并用SCID小鼠研究成纤维样滑膜细胞(FLS)对软骨的侵蚀作用.结果: (1)3种方法均分离出FLS,胶原酶与胰蛋白酶先后消化法分离细胞所需时间少、获得的细胞数多、纯度较高.(2)第2代细胞与第3代细胞的均质性分别达90%及98%以上.(3)在第3～6代的细胞比较稳定,增殖活跃;第7代以后增长缓慢,逐渐老化.(4)流式细胞术分析显示,原代细胞随着传代次数的增加逐渐纯化,第3～6代CD90+细胞＞98%,脯氨酰4-羟基化酶+细胞＞98%;与免疫组化检测波形蛋白的表达相一致.(5)将第4～5代的细胞和软骨一起植入SCID小鼠,或单独注入SCID小鼠的膝关节,都可导致软骨的浸蚀性破坏.结论: 以胶原酶与胰蛋白酶先后消化分离FLS,效果较好,CD90、脯氨酰4-羟基化酶可作为鉴定FLS的标志.用SCID小鼠可研究FLS对软骨的侵蚀特性.

关键词：类风湿性关节炎、成纤维样滑膜细胞、流式细胞术、SCID小鼠

所属期刊栏目：22

分类号：R392.11

资助基金：国家科技攻关项目2003AA215061

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：493-495