幽门螺杆菌Catalase基因的克隆、表达及其抗原性鉴定

摘要：

目的: 构建含人幽门螺杆菌(H pylori,Hp)过氧化氢酶(catalase,KatA)编码基因的重组质粒,测定、分析其核酸序列,并在E.coli中表达,研究其抗原性.方法: 应用PCR技术从Hp DNA染色体中扩增KatA编码基因片段,将其T-A克隆和测序,并与GenBank公布的其他Hp菌株的基因序列比较,再将目的基因插入至融合表达载体pGEX-4T-1中进行表达,用GST亲和层析对其进行纯化.纯化产物用于对29株小鼠抗Hp-全菌单克隆抗体(mAb)的鉴定及与Hp感染患者血清进行Western blot.结果: KatA基因全长为1 515 bp,并在GenBank上登录(No.DQ333889),与GenBank公布的其他Hp菌株的核酸的同源性为96%～97%,表达的KatA融合蛋白的相对分子质量(Mr)为85 000,29株小鼠抗Hp全菌mAb中有4株mAb是针对KatA的,表达产物可被Hp感染患者的血清特异性识别.结论: 重组KatA具有较好的抗原性,为Hp检测试剂和疫苗的研究奠定了基础.

关键词：幽门螺杆菌、catalase、克隆、基因表达、抗原性

所属期刊栏目：22

分类号：R378.99(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家科技攻关项目2001CB510208

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：440-442,446