10.3321/j.issn:1007-8738.2006.04.004
HCV-C蛋白抗原在人肝细胞株中的表达和鉴定
目的: 构建HCV-C蛋白基因的真核表达载体,并在正常人肝细胞HL-7702中表达与鉴定.方法: 从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011质粒中,扩增HCV core基因片段,构建pcDNA3.1(-)/core重组真核表达质粒.然后采用阳离子多聚体将其转染人正常肝细胞HL-7702,用免疫组化染色(SP)法检测HCV C蛋白的表达,并通过Western blot进行鉴定.结果: 所克隆的HCV-C基因片段的大小为573 bp,序列正确.成功地构建了pcDNA3.1(-)/core重组表达质粒.以其转染HL-7702细胞后,用SP免疫组化染色法检测到了C蛋白的表达.Western blot显示,其相对分子质量(Mr)约为21 000.结论: 构建的真核表达载体pcDNA3.1(-)/core在人肝细胞中能有效表达HCV-C蛋白,为以后相应抗体的制备打下了基础.
HCV、C蛋白、真核表达
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R392.11
国家留学回国人员科研项目教外司[2000]479;广东省博士启动基金粤科基办[2001]10-010371
2006-07-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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