联合应用活体染料CFDA-SE和SNARF-1检测混合淋巴细胞反应

摘要：

目的:建立一种能够对单向混合淋巴细胞反应中应答细胞的应答强度进行更全面评价的增殖检测方法.方法:BALB/cJ小鼠淋巴结细胞经CFDA-SE标记后作为应答细胞,BALB/cJ或C57BL/6小鼠脾细胞经丝裂霉素C处理后再用SNARF-1标记,作为刺激细胞,进行混合培养.混合培养96 h后收获细胞,用流式细胞术进行检测,分析SNARF-1-CFSE+应答细胞的增殖情况,并用ModFitTM软件拟和以获得更多增殖相关指数.结果:随着应答细胞分裂代数的增加,CFSE荧光强度逐渐减弱直至与刺激细胞无法分开,通过划除SNARF-1阳性细胞以确定应答细胞,解决了这一问题.应用ModFitrM软件,获得应答细胞的前体频率和增殖指数等多项重要的增殖相关指标.结论:联合应用CFSE和SNARF-1染色,结合流式细胞术,可作为评价混合淋巴细胞反应中应答细胞的应答强度的有力工具.

关键词：CFDA-SE、SNARF-1、混合淋巴细胞反应、增殖

所属期刊栏目：22

分类号：R392.12

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划30230350;中国科学院资助项目30500466;广东省自然科学基金05300419

在线出版日期：2006-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：382-384,387