一种新型戊型肝炎病毒样颗粒的表达、纯化及其免疫原性

摘要：

目的:以非包涵体形式表达含戊型肝炎病毒(HEV)中和抗原表位的新型HEV重组蛋白,并对其进行鉴定和分析.方法:将HEV开放阅读框架2(ORF2)编码452～617位氨基酸的基因片段连接到载体pET28a(+),转化大肠杆菌,获取表达克隆.以Ni-NTA层析柱纯化表达的蛋白,并用SDS-PAGE、Western blot和直接电镜负染等方法分析鉴定,最后免疫小鼠检测特异性抗体的产生水平.结果:表达的重组蛋白天然可溶,相对分子质量(Mr)约为22 000,并可形成直径为20 nm左右的病毒样颗粒,能与戊型肝炎患者血清发生Westem blot阳性反应,免疫小鼠后可诱导产生高滴度的特异性抗体.体外中和试验显示产生的抗体具有中和HEV的活性.结论:原核表达的、含HEV中和抗原表位的、长度仅166个氨基酸的HEV ORF2近3'端编码蛋白能够形成病毒样颗粒,而且该新型病毒样颗粒具有良好的抗原性和免疫原性.

关键词：戊型肝炎病毒、重组蛋白、中和抗原表位、病毒样颗粒

所属期刊栏目：22

分类号：R512.6(传染病)

资助基金：中国科学院资助项目30271231,30271212;江苏省自然科学基金BK2002053;江苏省卫生厅科技发展基金H200115;教育部留学基金2004-176

在线出版日期：2006-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：339-342