人CXCR1基因Tet-on可调控载体的构建及其在NIH3T3中的表达

摘要：

目的:构建CXCR1-pTREhyg可调控性真核表达载体,检测其在NIH3T3细胞内的表达情况.方法:通过RTPCR的方法从原代培养的类风湿性关节炎患者滑膜成纤维细胞中克隆得到CXCR1的全长基因,测序正确后将其亚克隆入pTREhyg载体中.用脂质体将pTet-on质粒和CXCR1-pTREhyg共转染入NIH3T3细胞,以不同浓度的强力霉素诱导,用Western blot检测CXCR1蛋白表达水平.结果:Western blot显示,我们所构建的可调控性表达载体能在NIH3T3细胞内表达,不同浓度药物诱导的CXCR1表达水平明显不同;同时还观察到IL-8刺激后,NIH3T3细胞中Erk-1/2磷酸化水平升高.结论:成功构建了CXCR1-pTREhyg真核表达载体,并可在NIH3T3细胞内表达.经IL-8刺激的转染NIH3T3细胞中Erk-1/2活性发生变化.为进一步观察CXCR1与类风湿性关节炎损伤之间的关系奠定了基础.

关键词：CXCR1、可调控表达载体、类风湿性关节炎

所属期刊栏目：22

分类号：R392.11

资助基金：科技部科研项目2002CB513007;中国科学院资助项目30300319,30571734

在线出版日期：2006-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：280-282