抗SARS冠状病毒M蛋白片段单克隆抗体的制备与初步鉴定

摘要：

目的: 制备抗SARS冠状病毒(SARS-CoV) M 蛋白N端1～43氨基酸(aa)单克隆抗体(mAb), 并对其特性进行初步鉴定.方法: 用纯化的SARS-M/GST融合蛋白抗原免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备抗M蛋白片段的mAb.用间接ELISA法筛选能分泌抗M蛋白片段mAb的杂交瘤细胞株. Western blot和间接ELISA鉴定所获mAb的特异性, 并用小鼠mAb亚类测定试剂盒检测所获的mAb Ig亚类.为分析mAb识别位点, 进一步将M蛋白片段截短为部分重叠的2段表达, 以Western blot初步定位mAb识别位点.结果: 获得1株可分泌特异性抗SARS-CoV M蛋白片段的mAb杂交瘤细胞株(3H9), Ig亚类鉴定为IgG2a, 轻链为κ型.Western blot显示其mAb可特异识别SARS-CoV M蛋白N端1～43aa, 间接ELISA证实mAb可与包被于聚苯乙烯微孔板上的SARS病毒全蛋白抗原发生特异性反应, 其识别位点位于M蛋白N端16～28aa.结论: 成功获得1株抗SARS-CoV M蛋白N端1～43aa mAb杂交瘤细胞, 并初步定位其识别位点.

关键词：SARS冠状病毒、单克隆抗体、M蛋白

所属期刊栏目：22

分类号：R392.11

资助基金：江苏省卫生厅非典快速启动项目H200308;江苏省教育厅SARS专项研究项目JH03-054;南京医科大学校科研和教改项目;江苏省南京市科技局科研项目200302004

在线出版日期：2006-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：213-215