10.3321/j.issn:1007-8738.2006.02.001
骨髓基质干细胞BMP-2和bFGF基因的联合修饰
目的: 建立能够稳定表达BMP-2及bFGF的骨髓基质干细胞, 优化骨组织工程种子细胞.方法: 通过RT-PCR方法获取全长BMP-2及bFGF基因, 克隆入真核表达载体pcDNA3. 0, 鉴定正确后, 经脂质体介导导入分离培养的大鼠骨髓基质干细胞, G418筛选稳定表达株.利用RT-PCR、 Western blot、 ELISA、免疫组织化学染色方法分析转染细胞外源基因表达情况.结果: 成功构建了全长BMP-2及bFGF的真核表达载体, 转染大鼠骨髓基质干细胞后经G418筛选获得稳定表达株. RT-PCR结果显示稳定转染细胞中具有大量目的基因mRNA转录, ELISA检测培养上清中目的蛋白表达阳性, Western blot、免疫组化结果显示胞质中有目的蛋白的表达.结论: 获得了可以稳定表达BMP-2及bFGF的骨髓基质干细胞, 有利于组织工程骨缺损修复中的应用.
骨髓基质干细胞、BMP-2、bFGF、基因转染
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R318.5(医用一般科学)
国家科技攻关项目2002AA326080
2006-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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