人IgE Cε3-Cε4蛋白的表达、复性、纯化及初步鉴定

摘要：

目的:获得IgE Fc段的Cε3-Cε4重组蛋白(E34).方法:以RT-PCR技术扩增IgE Cε3-Cε4(E34) cDNA片段,构建原核表达载体.以其转化大肠杆菌BL-21,诱导表达主要以包涵体形式存在的目的蛋白.经复性、纯化后,用Wes-tern blot和ELISA法初步鉴定所获E34蛋白与抗人IgE mAb的结合能力.结果:对克隆的E34基因片段测序表明,与已报道的序列相一致.获得的可溶性E34蛋白经SDS-PAGE鉴定显示,其相对分子质量(Mr)同预期的结果相一致.Western blot和ELISA法进一步证实,E34蛋白能够被鼠抗IgE mAb特异性识别.结论:成功地构建了pET28a(+)-E34表达载体,并获得能被抗IgE mAb特异性识别的可溶性蛋白E34,为下一步的工作打下了基础.

关键词：IgE、Cε3-Cε4、表达、复性、纯化

所属期刊栏目：22

分类号：R392.11

资助基金：中国科学院资助项目30490240

在线出版日期：2006-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：64-66,70