抗人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的:制备抗人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(hSLPI)单克隆抗体(mAb).方法:以hSLPI为免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗hSLPI mAb.采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞术、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性.结果:获得4株可稳定分泌抗hSLPI mAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb均为IgM.Western blot分析表明,此株mAb所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为12 000.免疫组化染色表明,mAb与肺和结肠组织的上皮细胞、疑似肥大细胞、扁桃体和包皮组织的疑似肥大细胞的反应性均呈阳性.流式细胞术分析显示,4株mAb与人肺腺癌细胞系A549细胞中的SLPI均呈阳性反应.激光共聚焦扫描显微镜观察,荧光标记的阳性反应物主要位于A549细胞的胞质内.结论:成功地制备抗hSLPI mAb,为变态反应性疾病和炎症性疾病的研究工作提供了有用的试剂.

关键词：人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂、单克隆抗体、特性鉴定

所属期刊栏目：22

分类号：R392.11

资助基金：中国科学院资助项目30471601;广东省科技计划2003B31502;广东省博士启动基金04106122;李嘉诚基金C0200001

在线出版日期：2006-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：54-57