哺乳动物shRNA表达载体的构建及鉴定

摘要：

目的: 构建带有绿色荧光蛋白报告基因的哺乳动物shRNA表达载体.方法: 用PCR方法从含有人U6启动子的载体PTZU6+1中扩增U6启动子, 将其克隆到pEGFP-C1载体中,通过限制性内切酶、PCR及测序对构建的载体进行鉴定, 以其转染HepG2细胞后, 在倒置荧光显微镜下初步观察绿色荧光蛋白的表达.结果: 经限制性内切酶、PCR及测序证实, 成功地构建哺乳动物shRNA表达载体.以其转染HepG2细胞后可以表达绿色荧光蛋白.结论: 构建了带有绿色荧光蛋白报告基因的哺乳动物shRNA表达载体,为以后运用该载体进行RNAi相关研究奠定了一定的基础.

关键词：shRNA、RNA、哺乳动物

所属期刊栏目：21

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：四川省教育厅资助项目2003A066

在线出版日期：2005-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：786-788