小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究

摘要：

目的: 构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用. 方法: 从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA, 应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA, 并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体.以脂质体法转染HUVEC,经G418筛选后,用流式细胞术检测OX40分子的表达.采用 3H-TdR掺入法,研究OX40信号对体外培养的B细胞的促分化作用.结果: 构建了OX40基因的真核表达载体.经PCR、酶切和测序证实, 插入的目的片段与GenBank登录的小鼠OX40 cDNA序列完全一致.用G418筛选后,获得能稳定表达小鼠OX40蛋白的HUVEC细胞.3H-TdR掺入法结果显示,小鼠OX40稳定表达的细胞HUVEC对体外培养的B细胞具有促增殖、分化的作用.OX40/OX40L信号与CD40/CD40L信号具有协同作用.结论: 成功地构建小鼠OX40稳定表达地细胞,OX40对B细胞具有促增殖、分化作用.

关键词：OX40、绿荧光蛋白表达载体、稳定表达、增殖

所属期刊栏目：21

分类号：R392.11

在线出版日期：2005-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：767-770