肝癌相关抗原HAb18G的高效原核表达及其体外功能的研究

摘要：

目的: 构建HAb18G的原核表达载体, 并在大肠杆菌中诱导高效表达, 进行功能、免疫原性测定.方法: 采用PCR技术, 从已构建的pBluescript/HAb18G克隆载体中扩增HAb18G全长cDNA, 克隆入原核表达载体pRSET-C,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达, 表达产物用SDS-PAGE检测, 表达量用激光薄层扫描检测.纯化表达的HAb18G蛋白, 并用明胶酶谱和ELISA法进行测定.结果: 双酶切及DNA测序证实, 载体构建正确.SDS-PAGE鉴定表明, 表达产物的相对分子质量(Mr)为34 600,与理论值相符.激光薄层扫描检测, 表达量占菌体总蛋白量的33%.明胶酶谱结果呈阴性,但ELISA测定结果呈阳性.结论: 实现了HAb18G的原核高效表达.初步证明,该蛋白具有免疫原性但无刺激产生基质金属蛋白酶的功能,为HAb18G蛋白的大量制备及深入研究奠定了基础.

关键词：肝癌抗原、原核表达、功能研究

所属期刊栏目：21

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金30070842

在线出版日期：2005-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：734-737