抗人宫颈癌单链抗体的基因构建、空间结构和进化分析

摘要：

目的: 构建抗人宫颈癌单链抗体(scFv)基因CSAs-1,并进行二级结构和三级结构预测、理化性质分析及进化树构建.方法: 采用重叠延伸PCR方法, 以能特异性分泌抗人宫颈癌mAb的杂交瘤细胞株CSA125为原料,构建抗人宫颈癌scFv基因CSAs-1, 进行测序; 并通过Internet对其进行结构预测和进化树构建.结果: 抗人宫颈癌scFv基因CSAs-1有834 bp,对应278个氨基酸的多肽, 等电点预测值7.215,为碱性蛋白质; PHDsec二级结构显示CSAs-1属于α+β蛋白, V H和V L区均有多个蛋白激酶C磷酸化位点、酪蛋白激酶II磷酸化位点; CSAs-1三级结构建模显示V L和V H形成一个疏水的“口袋”, Linker游离于此结构之外.以上结果表明: CSAs-1符合scFv的结构特点,明显具有抗原结合位点的空间构象, 理论上应该具有良好的抗原结合活性.进化分析发现脊椎动物V基因形成三个进化群, CSAs-1 V区分布于进化树的A群中.结论: 构建一个鼠源性抗人宫颈癌scFv基因CSAs-1,为该基因的进一步原核和真核表达打下了基础; 应用信息学技术所获得的预测和分析结果为CSAs-1表达、纯化和活性研究提供了大量的信息; 为进一步分析抗体V H、V L在抗体功能中的作用、改造抗体、实现抗体的人源化、提高抗体的活性等方面提供了一定的依据.

关键词：宫颈癌、单链抗体、结构预测、进化分析

所属期刊栏目：21

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：陕西省自然科学基金99SM52

在线出版日期：2005-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：723-726