人β2微球蛋白基因启动子的克隆及其在P815细胞中的活性研究

摘要：

目的: 克隆人β2微球蛋白(β2m)基因启动子,并研究其在小鼠肥大细胞瘤细胞P815中对下游报告基因的启动活性.方法: 用PCR法从基因组内扩增β2m基因启动子.通过基因重组的方法, 构建含此启动子的EGFP基因真核表达载体, 然后分别瞬时和稳定转染P815细胞.通过 RT PCR、荧光显微镜摄像和流式细胞术分析, 观察IFN-γ作用前后EGFP的表达.结果: 从基因组内扩增出302 bp的人β2m基因的启动子, 成功地构建了含此启动子的真核报告载体.RTPCR的结果表明, IFN-γ对启动子的活性具有诱导作用, 且呈浓度依赖性.流式细胞术的结果显示,在5×10 5 U/L IFN-γ作用下,尽管表达EGFP的细胞数量没有差异, 但刺激组EGFP的表达强度是未刺激组的2倍.结论: 人β2m基因启动子在小鼠肥大细胞瘤细胞P815中具有高度的启动活性.通过该启动子中所含干扰素刺激反应元件(ISRE),可在IFN-γ诱导作用下调控下游目的基因的表达.

关键词：β2微球蛋白、启动子、IFN-γ

所属期刊栏目：21

分类号：R392.11

资助基金：上海市科委资助项目03DZ19235

在线出版日期：2005-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：672-675