幽门螺杆菌尿素酶B亚单位核酸疫苗的构建及鉴定

摘要：

目的: 克隆幽门螺杆菌 Hp ureB基因,并构建其核酸疫苗.方法: 以 Hp NCTC11637株基因组DNA为模板, 用PCR扩增ureB基因,并亚克隆至pMD18-T载体中.将目的基因经 Sal I、Bgl Ⅱ酶切纯化后插入pTCAE中, 转化 E.coli DH5α.经 Sal I、Xho I酶切并测序鉴定的阳性重组质粒命名为pT-ureB.以电穿孔法将pT ureB转染CHO细胞, 用Western blot检测UreB蛋白的表达.结果: 克隆重组后得到pT-ureB.将pT-ureB以电穿孔法转染CHO细胞后, 取其培养上清进行Western blot检测,在UreB的相对分子质量( M r)为 62 000 处出现特异性条带.结论: 成功地构建了 Hp ureB核酸疫苗.体外转染CHO细胞后,经Western blot检测证实有UreB蛋白的表达,为进一步的相关研究奠定了基础.

关键词：幽门螺杆菌、ureB、DNA疫苗

所属期刊栏目：21

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA215161

在线出版日期：2005-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：665-667