10.3321/j.issn:1007-8738.2005.05.022
抗3种标签蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定
目的: 制备并鉴定抗GST、His×6及FLAG的单克隆抗体(mAb).方法: 分别以含GST、 His×6及FLAG标签的融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合制备抗相应标签蛋白的mAb.用Western blot检测mAb对变性融合蛋白的反应性.用流式细胞术(FCM)检测抗FLAGmAb对细胞膜表面融合蛋白的反应性.结果: 共获得12株可稳定分泌抗3种标签蛋白mAb的杂交瘤细胞(其中5株可分泌抗GST mAb,5株可分泌抗His×6 mAb,2株可分泌抗FLAG mAb).11株mAb均可用于相应融合蛋白的Western blot检测.1株抗FLAGmAb检测细胞膜表面融合蛋白的阳性率,与商品化的mAb M2相接近.用1株抗His×6 mAb制备亲和层析柱,并用于纯化IL-8-His融合蛋白,也获得较满意的结果.结论: 成功地制备了抗GST、抗His×6及抗FLAG的mAb,为含标签的融合蛋白的研究和应用提供了重要的工具.
标签蛋白、GST、FLAG、单克隆抗体
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R392.11
国家自然科学基金30371281;中国人类肝脏蛋白组学项目
2005-10-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
613-614,618