猪FasL基因在猪软骨细胞上的表达和鉴定

摘要：

目的: 实现猪Fas配体(FasL)基因在猪软骨细胞中表达和鉴定.方法: 用RT-PCR扩增猪FasL基因片段, 构建重组pGCEN-FasL逆转录病毒载体, 并转染PA317细胞.经G418筛选获得高滴度的病毒液, 感染猪软骨细胞, 应用FACS和Western blot检测软骨细胞上FasL的表达.结果: 经酶切分析、测序证明, 成功地构建pGCEN-FasL逆转录病毒载体.转染的软骨细胞表面FasL的表达率为57%.Western blot显示, 在Mr为37 000处有1条特异性蛋白带, 具有诱导Fas +细胞凋亡的作用.结论: 成功地构建重组猪FasL基因的逆转录病毒载体, 并在转染的软骨细胞上高表达具有生物学活性的FasL, 为建立同种异体软骨细胞移植的免疫耐受提供了实验依据.

关键词：软骨细胞、FasL基因、逆转录病毒载体、表达、猪

所属期刊栏目：21

分类号：R392.12

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划G1999054300

在线出版日期：2005-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：133-136